Стівен Амелл народився 8 травня 1981 року в Торонто, Онтаріо. Навчався в «Коледжі Святого Ендрю» — приватній школі для хлопчиків, розташованої в місті Аврора, Онтаріо.
Широка популярність прийшла до актора після зйомок в серіалі «Кав'ярня» та драмі «Замикаючи коло» з Мішею Бартон та Ширлі Маклейн в головних ролях. Крім того, він зіграв Адама в першому сезоні шоу «Бухта Данте», але у другому сезоні був замінений Джоном Флемінгом.
Амелл знявся в гостьових епізодах, у багатьох популярних телесеріалах: «Близькі друзі» (тренер вело-пробігу — в титрах вказаний як Стів Амелл), «Жеребець» (жиголо Джейсон, більш молодий конкурент персонажа Томаса Джейна), «90210: Нове покоління» (вважався зниклим безвісти рибалкою Джимом, друг героя Метта Лантера), «Новенька» (з Зої Дешанель та Максом Грінфілдом), «Приватна практика» (персонажа Скотті).
Амелл був у постійному складі шоу «Маленька перукарня», «Рідні землі», «Щоденники вампіра» (перевертень Брейді у другому сезоні), а також знявся в телевізійному фільмі каналу Lifetime під назвою «Правосуддя Наталі Холловей», прем'єра якого відбулася в травні 2011 року.
У січні 2012 року стало відомо, що Амелл отримав головну роль в пілоті каналу The CW, «Стріла» про пригоди популярного персонажа коміксів Олівера Квінна, на прізвисько «Зелена стріла», раніше з'являвся в серіалі «Таємниці Смолвіля» того ж каналу — в цьому шоу роль виконав Джастін Хартлі.
